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發(fā)布時(shí)間： 2021-11-24 點(diǎn)擊次數： 1459次elisa試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的elisa試劑盒，其試劑安穩、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區分客觀(guān)等要素，適宜于大規模篩查實(shí)驗又能夠用于少數標本的檢查，能夠做定性實(shí)驗也能夠做定量分析。試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。elisa試劑盒中常用的防腐劑有：1、疊氮鈉是HRP的抑制劑，凡是和HRP接觸的試劑，一定不能用；2、硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用，但因其有毒，較少使用；3、市面許多試劑盒產(chǎn)品，用抗生素做防腐劑較多，如慶大。4、如果試劑僅在實(shí)驗室短期使用，其實(shí)并不需加防腐劑，常規試劑放4度冰箱，抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。5、防污染可添加0.02%的疊氮鈉，或0.01%的硫柳汞。疊氮鈉在多數情況下有用且有效，但在有些實(shí)驗中卻不合適，因為它能阻斷細胞的電子傳遞鏈，對許多生物體都有毒性，因此不能用于活體實(shí)驗；因為含有氨基而能干擾許多標記方法；不能用于辣根過(guò)氧化物酶標記的抗體。而硫柳汞不含氨基，不影響基質(zhì)的穩定性。如果將抗體應用于生物活性檢測、體內實(shí)驗，一般不使用任何防腐劑，這些實(shí)驗用的抗體應少量分裝冷存，切忌反復凍融。6、吐溫-20是作為穩定劑，可減少非特異性黏合。7、甘油是防止凍融過(guò)程中的固-液相變而引起蛋白變性，能有效地增強蛋白質(zhì)的穩定性，-20度凍存時(shí)甘油的濃度可以在20~30%。- 下一篇：多聚蛋白胨的操作也是有技巧的
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